IC50、EC50、Ki：剂量效应参数怎么区分
2026-10-17 · 专业著作 · 百灵威授权转载
同一篇文献里，同一个化合物有时写 IC50，有时写 EC50，还常常附一个 Ki。三个数看上去相近，含义却不在一个层面上，直接拿来横向比较或者填进表格，很容易把结论带偏。要分清它们，关键不是记数值，而是记住每个参数回答的是哪个问题。
一、IC50 回答的是抑制一半需要多少
IC50 指在设定的实验条件下，让某种可测响应相对对照下降一半所需的化合物浓度。注意这里的三个限定：响应是什么（酶活、细胞活力、某条通路的磷酸化水平）、体系是什么、条件是什么。同一个化合物测酶活得到的 IC50，和测细胞增殖得到的 IC50 可以差出很远，因为细胞膜通透性、外排转运、胞内底物与蛋白结合都在中间起作用。所以 IC50 是表观值，不是分子常数，换一个底物浓度或孵育时间，它就会变。
二、EC50 回答的是效应达到一半需要多少
EC50 指产生最大效应一半所需的浓度，原本用于激动剂或激活剂的剂量效应曲线。它与 IC50 的差别不在数值大小，而在曲线的方向和读出：IC50 描述的是抑制，EC50 描述的是效应。实际写作里有一处常见的混乱：抑制性曲线同样可以用效应模型拟合，某些软件也会输出一个 EC50，此时它与 IC50 可能数值接近，含义取决于你把哪一端定义为效应、曲线朝哪个方向走。读别人的数据时，先看曲线方向与纵轴标注，比看参数名更可靠。
三、Ki 站在结合层面
Ki 是抑制剂与靶点结合的平衡解离常数，反映的是分子层面的亲和力，理想情况下不随底物浓度变化。IC50 则随底物浓度、ATP 水平、孵育时间漂移。两者之间存在常用的换算关系（如 Cheng-Prusoff 关系），但换算需要知道底物浓度与酶的米氏常数，并且只在竞争性抑制等模型假设成立时才可靠；条件不满足时换算出来的 Ki 只是近似值。因此看到 Ki 时，应同时看它是不是由 IC50 换算来的、用了什么底物条件。
四、为什么这些数不能直接横比
第一是比较的层次不同。酶水平、细胞水平、整体动物得到的数值不在同一量纲上，细胞实验里还有血清蛋白结合、转运体、胞内药物浓度等变量。
第二是实验条件不同。底物浓度、孵育时长、读出方式、曲线拟合模型都会改变结果，甚至同一实验室不同批次也会不同。
第三是报道方式不同。有的给均值，有的给范围，有的只给单个代表性实验，重复次数和离散程度往往决定这个数能不能用。
第四是化合物形式不同。同一化合物以游离碱还是盐的形式称量，相同质量对应的有效物质量并不一样，换算时若忽略这一点，横向比较就失去意义。
实用的做法是：只与同一种读出、相近条件下的数值比较；引用时写明体系与条件；把文献值和自己的实测值分开列。具体参数定义、测定条件与换算前提，以原始文献和试剂说明书为准。
五、小结
一句话：IC50 看抑制一半，EC50 看效应一半，Ki 看结合亲和力，三者不能互换。
记住：先看曲线方向和读出，再谈数值；跨文献比较必须同条件。
一、IC50 回答的是抑制一半需要多少
IC50 指在设定的实验条件下，让某种可测响应相对对照下降一半所需的化合物浓度。注意这里的三个限定：响应是什么（酶活、细胞活力、某条通路的磷酸化水平）、体系是什么、条件是什么。同一个化合物测酶活得到的 IC50，和测细胞增殖得到的 IC50 可以差出很远，因为细胞膜通透性、外排转运、胞内底物与蛋白结合都在中间起作用。所以 IC50 是表观值，不是分子常数，换一个底物浓度或孵育时间，它就会变。
二、EC50 回答的是效应达到一半需要多少
EC50 指产生最大效应一半所需的浓度，原本用于激动剂或激活剂的剂量效应曲线。它与 IC50 的差别不在数值大小，而在曲线的方向和读出：IC50 描述的是抑制，EC50 描述的是效应。实际写作里有一处常见的混乱：抑制性曲线同样可以用效应模型拟合，某些软件也会输出一个 EC50，此时它与 IC50 可能数值接近，含义取决于你把哪一端定义为效应、曲线朝哪个方向走。读别人的数据时，先看曲线方向与纵轴标注，比看参数名更可靠。
三、Ki 站在结合层面
Ki 是抑制剂与靶点结合的平衡解离常数，反映的是分子层面的亲和力，理想情况下不随底物浓度变化。IC50 则随底物浓度、ATP 水平、孵育时间漂移。两者之间存在常用的换算关系（如 Cheng-Prusoff 关系），但换算需要知道底物浓度与酶的米氏常数，并且只在竞争性抑制等模型假设成立时才可靠；条件不满足时换算出来的 Ki 只是近似值。因此看到 Ki 时，应同时看它是不是由 IC50 换算来的、用了什么底物条件。
四、为什么这些数不能直接横比
第一是比较的层次不同。酶水平、细胞水平、整体动物得到的数值不在同一量纲上，细胞实验里还有血清蛋白结合、转运体、胞内药物浓度等变量。
第二是实验条件不同。底物浓度、孵育时长、读出方式、曲线拟合模型都会改变结果，甚至同一实验室不同批次也会不同。
第三是报道方式不同。有的给均值，有的给范围，有的只给单个代表性实验，重复次数和离散程度往往决定这个数能不能用。
第四是化合物形式不同。同一化合物以游离碱还是盐的形式称量，相同质量对应的有效物质量并不一样，换算时若忽略这一点，横向比较就失去意义。
实用的做法是：只与同一种读出、相近条件下的数值比较；引用时写明体系与条件；把文献值和自己的实测值分开列。具体参数定义、测定条件与换算前提，以原始文献和试剂说明书为准。
五、小结
一句话：IC50 看抑制一半，EC50 看效应一半，Ki 看结合亲和力，三者不能互换。
记住：先看曲线方向和读出，再谈数值；跨文献比较必须同条件。
