C18、C8、氨基柱……色谱柱填料怎么选?
2026-09-19 · 趣味化学 · 百灵威授权转载
选柱子先选填料。色谱柱填料类型有哪些?C18、C8、氨基柱各干什么?这篇文章一次讲清怎么选。
一、常见填料类型
C18:十八烷基硅烷键合相,疏水性最强,反相色谱最通用。
C8:辛基键合相,疏水性比C18弱,保留时间短一些。
C4:丁基键合相,疏水性更弱,适合蛋白、多肽等大分子。
苯基柱:带苯环,有π-π作用,适合芳香族化合物和异构体。
氨基柱:正相或弱阴离子交换,糖类分析常用。
氰基柱:正相反相两用,中等极性,灵活。
硅胶柱:正相色谱,极性化合物分离。
二、C18与C8的区别
保留能力:C18链更长、疏水更强、保留更强;C8保留弱一些。
适用样品:C18适合宽范围样品,最通用;样品在C18上保留太强、跑得慢,换C8。
分析速度:C8平衡更快、分析时间短一些。
选择建议:拿不准先用C18,保留太强再换C8。
三、其他常用填料
氨基柱:糖、碳水化合物分析,正相模式分离,反相模式也能用。
HILIC柱:亲水作用色谱,极性大的化合物保留差时用。
离子交换柱:阴阳离子、氨基酸分离,按电荷选。
手性柱:手性拆分,对映体分离用。
四、按样品选柱
疏水性样品:常规反相C18;保留太强换C8或C4。
极性化合物:C18上不保留,用HILIC、氨基柱或正相柱。
糖类:氨基柱,流动相用乙腈水。
蛋白多肽:C4、大孔径柱,减少不可逆吸附。
芳香异构体:苯基柱,利用π-π作用。
五、粒径与孔径
粒径:常规5微米,UPLC用1。8到3微米,粒径小柱效高、压力大。
孔径:常规80到120埃,大分子用300埃以上,防排阻。
匹配:粒径孔径要和仪器和样品匹配,别混搭。
六、常见问题
问:色谱柱填料类型有哪些?
答:常见反相C18、C8、C4、苯基柱,正相硅胶柱,氨基柱、氰基柱、HILIC柱、离子交换柱、手性柱,按样品性质选。
问:C18和C8怎么选?
答:常规样品先试C18;样品在C18上保留太强、出峰慢,换C8缩短时间。
问:氨基柱是干嘛的?
答:氨基柱用于糖类、碳水化合物分析,正相或反相模式都能用,是糖分析的经典柱子。
问:极性化合物用什么柱?
答:C18上不保留的强极性化合物,用HILIC柱、氨基柱或正相硅胶柱。
问:蛋白质用什么柱?
答:C4或大孔径反相柱,减少大分子不可逆吸附,峰形更好。
问:粒径怎么选?
答:常规分析用5微米,追求速度和分离度用亚2微米,要匹配仪器压力。
七、总结
色谱柱填料选择,一句话:反相先C18,保留太强换C8,大分子C4,糖类氨基柱,极性HILIC。记住:按样品疏水性、极性、分子大小选,粒径孔径匹配仪器。填料选对,分离不费劲
一、常见填料类型
C18:十八烷基硅烷键合相,疏水性最强,反相色谱最通用。
C8:辛基键合相,疏水性比C18弱,保留时间短一些。
C4:丁基键合相,疏水性更弱,适合蛋白、多肽等大分子。
苯基柱:带苯环,有π-π作用,适合芳香族化合物和异构体。
氨基柱:正相或弱阴离子交换,糖类分析常用。
氰基柱:正相反相两用,中等极性,灵活。
硅胶柱:正相色谱,极性化合物分离。
二、C18与C8的区别
保留能力:C18链更长、疏水更强、保留更强;C8保留弱一些。
适用样品:C18适合宽范围样品,最通用;样品在C18上保留太强、跑得慢,换C8。
分析速度:C8平衡更快、分析时间短一些。
选择建议:拿不准先用C18,保留太强再换C8。
三、其他常用填料
氨基柱:糖、碳水化合物分析,正相模式分离,反相模式也能用。
HILIC柱:亲水作用色谱,极性大的化合物保留差时用。
离子交换柱:阴阳离子、氨基酸分离,按电荷选。
手性柱:手性拆分,对映体分离用。
四、按样品选柱
疏水性样品:常规反相C18;保留太强换C8或C4。
极性化合物:C18上不保留,用HILIC、氨基柱或正相柱。
糖类:氨基柱,流动相用乙腈水。
蛋白多肽:C4、大孔径柱,减少不可逆吸附。
芳香异构体:苯基柱,利用π-π作用。
五、粒径与孔径
粒径:常规5微米,UPLC用1。8到3微米,粒径小柱效高、压力大。
孔径:常规80到120埃,大分子用300埃以上,防排阻。
匹配:粒径孔径要和仪器和样品匹配,别混搭。
六、常见问题
问:色谱柱填料类型有哪些?
答:常见反相C18、C8、C4、苯基柱,正相硅胶柱,氨基柱、氰基柱、HILIC柱、离子交换柱、手性柱,按样品性质选。
问:C18和C8怎么选?
答:常规样品先试C18;样品在C18上保留太强、出峰慢,换C8缩短时间。
问:氨基柱是干嘛的?
答:氨基柱用于糖类、碳水化合物分析,正相或反相模式都能用,是糖分析的经典柱子。
问:极性化合物用什么柱?
答:C18上不保留的强极性化合物,用HILIC柱、氨基柱或正相硅胶柱。
问:蛋白质用什么柱?
答:C4或大孔径反相柱,减少大分子不可逆吸附,峰形更好。
问:粒径怎么选?
答:常规分析用5微米,追求速度和分离度用亚2微米,要匹配仪器压力。
七、总结
色谱柱填料选择,一句话:反相先C18,保留太强换C8,大分子C4,糖类氨基柱,极性HILIC。记住:按样品疏水性、极性、分子大小选,粒径孔径匹配仪器。填料选对,分离不费劲