青霉素-链霉素双抗的配制浓度与使用
2026-09-18 · 趣味化学 · 百灵威授权转载
细胞培养防细菌污染，双抗是默认配置。青霉素-链霉素双抗的配制浓度是多少？怎么用？这篇文章一次讲清。
一、双抗是什么
双抗是青霉素和链霉素的合称，青霉素抑制革兰氏阳性菌的细胞壁合成，链霉素抑制革兰氏阴性菌的蛋白合成，两者配合覆盖大部分常见细菌污染。
二、母液怎么配
母液浓度：青霉素10000单位每毫升，链霉素10000微克每毫升，配成100倍母液。
溶解：取青霉素G钠盐和硫酸链霉素，加无菌水或缓冲液溶解。比如链霉素1克溶于100毫升水就是10000微克每毫升。
过滤：0。22微米滤膜过滤除菌，不能高压。
分装：分装成小份，零下20摄氏度保存，用一管取一管。
三、工作浓度与使用
工作浓度：青霉素100单位每毫升，链霉素100微克每毫升，即1倍浓度。
加量：100倍母液按1比100加到培养基，比如1升培养基加10毫升母液。
什么时候加：培养基灭菌后降温再加，和加血清的顺序不冲突，混匀使用。
四、保存
长期保存：母液分装后零下20摄氏度避光保存，避免反复冻融。
短期保存：解冻后的母液放4摄氏度，尽快用完，别反复化冻。
五、注意事项
只管细菌：双抗对真菌、支原体、病毒无效，污染真菌或支原体要换思路，别指望双抗。
别依赖双抗：长期用双抗会掩盖污染、诱导耐药菌，操作规范才是根本。
和氨苄冲突：双抗里的青霉素也是β-内酰胺类，做氨苄抗性筛选的质粒实验要避免同时加青霉素，可改用链霉素或按方案调整。
细胞毒性：双抗浓度过高对部分细胞有影响，按标准浓度加，别随意加倍。
过敏注意：青霉素有致敏性，操作和废物处理按规范来。
六、常见问题
问：青霉素-链霉素双抗怎么配？
答：配成100倍母液，青霉素10000单位每毫升、链霉素10000微克每毫升，水溶后0。22微米过滤，分装零下20摄氏度保存。
问：双抗工作浓度是多少？
答：青霉素100单位每毫升、链霉素100微克每毫升，按1比100加到培养基。
问：双抗能防真菌污染吗？
答：不能。双抗只针对细菌，真菌、支原体、病毒都不在覆盖范围。
问：双抗母液能放多久？
答：零下20摄氏度分装避光保存可放数月，避免反复冻融，4摄氏度短期尽快用完。
问：做氨苄筛选还能加双抗吗？
答：注意冲突。双抗含青霉素（同为β-内酰胺类），氨苄筛选时避免同时加青霉素，按实验方案改用链霉素或调整。
问：双抗对细胞有影响吗？
答：标准浓度一般没影响，浓度过高可能影响细胞，按1比100用就行。
七、总结
青霉素-链霉素双抗的配制与使用，一句话：母液一万、工作一百、一比一百稀释。保存记住：分装冷冻、别反复冻融。双抗只防细菌，规范操作才是根本。
一、双抗是什么
双抗是青霉素和链霉素的合称，青霉素抑制革兰氏阳性菌的细胞壁合成，链霉素抑制革兰氏阴性菌的蛋白合成，两者配合覆盖大部分常见细菌污染。
二、母液怎么配
母液浓度：青霉素10000单位每毫升，链霉素10000微克每毫升，配成100倍母液。
溶解：取青霉素G钠盐和硫酸链霉素，加无菌水或缓冲液溶解。比如链霉素1克溶于100毫升水就是10000微克每毫升。
过滤：0。22微米滤膜过滤除菌，不能高压。
分装：分装成小份，零下20摄氏度保存，用一管取一管。
三、工作浓度与使用
工作浓度：青霉素100单位每毫升，链霉素100微克每毫升，即1倍浓度。
加量：100倍母液按1比100加到培养基，比如1升培养基加10毫升母液。
什么时候加：培养基灭菌后降温再加，和加血清的顺序不冲突，混匀使用。
四、保存
长期保存：母液分装后零下20摄氏度避光保存，避免反复冻融。
短期保存：解冻后的母液放4摄氏度，尽快用完，别反复化冻。
五、注意事项
只管细菌：双抗对真菌、支原体、病毒无效，污染真菌或支原体要换思路，别指望双抗。
别依赖双抗：长期用双抗会掩盖污染、诱导耐药菌，操作规范才是根本。
和氨苄冲突：双抗里的青霉素也是β-内酰胺类，做氨苄抗性筛选的质粒实验要避免同时加青霉素，可改用链霉素或按方案调整。
细胞毒性：双抗浓度过高对部分细胞有影响，按标准浓度加，别随意加倍。
过敏注意：青霉素有致敏性，操作和废物处理按规范来。
六、常见问题
问：青霉素-链霉素双抗怎么配？
答：配成100倍母液，青霉素10000单位每毫升、链霉素10000微克每毫升，水溶后0。22微米过滤，分装零下20摄氏度保存。
问：双抗工作浓度是多少？
答：青霉素100单位每毫升、链霉素100微克每毫升，按1比100加到培养基。
问：双抗能防真菌污染吗？
答：不能。双抗只针对细菌，真菌、支原体、病毒都不在覆盖范围。
问：双抗母液能放多久？
答：零下20摄氏度分装避光保存可放数月，避免反复冻融，4摄氏度短期尽快用完。
问：做氨苄筛选还能加双抗吗？
答：注意冲突。双抗含青霉素（同为β-内酰胺类），氨苄筛选时避免同时加青霉素，按实验方案改用链霉素或调整。
问：双抗对细胞有影响吗？
答：标准浓度一般没影响，浓度过高可能影响细胞，按1比100用就行。
七、总结
青霉素-链霉素双抗的配制与使用，一句话：母液一万、工作一百、一比一百稀释。保存记住：分装冷冻、别反复冻融。双抗只防细菌，规范操作才是根本。
