PBS缓冲液是什么?配方、用途与配制步骤
2026-09-17 · 趣味化学 · 百灵威授权转载
细胞实验、免疫实验里天天用的 PBS,到底是个什么溶液?PBS 缓冲液是什么?配方怎么配?有什么用途?这篇文章一次讲清。
一、PBS 缓冲液是什么
PBS 是磷酸盐缓冲盐水的简称,由氯化钠、氯化钾、磷酸氢二钠和磷酸二氢钾组成。它既有磷酸盐的缓冲能力,又含盐保持渗透压,pH 约 7。2 到 7。4,与生理环境接近,对细胞温和。
二、常用配方
1 倍工作液(1000 毫升):氯化钠约 8 克,氯化钾约 0。2 克,磷酸氢二钠(十二水)约 3。58 克,磷酸二氢钾约 0。24 克,纯水定容至 1000 毫升。
10 倍储备液:按上述量的 10 倍称量配成,用时稀释 10 倍,方便大量使用。
三、配制步骤
称量:按配方称取四种盐。
溶解:加纯水约 800 毫升,搅拌溶解。
调 pH:用稀盐酸或氢氧化钠调到目标 pH,边加边测。
定容:补纯水至 1000 毫升,混匀。
灭菌:高压灭菌或过滤灭菌,冷却后复核 pH。
四、pH 与渗透压要点
pH 控制:目标约 7。2 到 7。4,调 pH 时用稀酸稀碱,避免局部过浓。
渗透压:盐浓度决定渗透压,接近等渗是细胞友好的关键,配方别随意改。
灭菌影响:高压灭菌后 pH 可能微变,冷却后复核,必要时再调。
五、主要用途
细胞培养:洗涤细胞、稀释细胞悬液,维持缓冲环境。
免疫实验:免疫组化、免疫荧光的洗涤和抗体稀释。
ELISA:包被后洗涤、样品和抗体稀释。
蛋白实验:透析、纯化过程中的缓冲介质。
组织处理:组织切片的洗涤和缓冲。
六、常见问题
问:PBS 缓冲液是什么?
答:磷酸盐缓冲盐水,由氯化钠、氯化钾、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾组成,pH 约 7。2 到 7。4、等渗,对细胞温和,实验室通用。
问:PBS 怎么配?
答:氯化钠约 8 克、氯化钾约 0。2 克、磷酸氢二钠(十二水)约 3。58 克、磷酸二氢钾约 0。24 克,纯水定容至 1000 毫升,调 pH 并灭菌。
问:PBS 和 TBS 有什么区别?
答:缓冲体系不同,PBS 用磷酸盐缓冲,TBS 用 Tris 缓冲,都含氯化钠保持渗透压,按实验体系选用。
问:PBS 能高压灭菌吗?
答:可以。高压灭菌后 pH 可能微变,冷却后复核,必要时微调。
问:PBS 怎么保存?
答:无菌分装、冷藏保存,标注日期,发现浑浊或污染即弃。
问:PBS 里的氯化钠能不加吗?
答:不能随意省。氯化钠维持渗透压,去掉后渗透压改变,细胞实验会受影响。
七、总结
PBS 缓冲液是什么?一句话:磷酸盐缓冲加盐水,pH 中性、等渗、对细胞温和。配方记住四盐,配制记住四步:称量、溶解、调 pH、定容灭菌。用对 PBS,细胞和免疫实验都顺。
一、PBS 缓冲液是什么
PBS 是磷酸盐缓冲盐水的简称,由氯化钠、氯化钾、磷酸氢二钠和磷酸二氢钾组成。它既有磷酸盐的缓冲能力,又含盐保持渗透压,pH 约 7。2 到 7。4,与生理环境接近,对细胞温和。
二、常用配方
1 倍工作液(1000 毫升):氯化钠约 8 克,氯化钾约 0。2 克,磷酸氢二钠(十二水)约 3。58 克,磷酸二氢钾约 0。24 克,纯水定容至 1000 毫升。
10 倍储备液:按上述量的 10 倍称量配成,用时稀释 10 倍,方便大量使用。
三、配制步骤
称量:按配方称取四种盐。
溶解:加纯水约 800 毫升,搅拌溶解。
调 pH:用稀盐酸或氢氧化钠调到目标 pH,边加边测。
定容:补纯水至 1000 毫升,混匀。
灭菌:高压灭菌或过滤灭菌,冷却后复核 pH。
四、pH 与渗透压要点
pH 控制:目标约 7。2 到 7。4,调 pH 时用稀酸稀碱,避免局部过浓。
渗透压:盐浓度决定渗透压,接近等渗是细胞友好的关键,配方别随意改。
灭菌影响:高压灭菌后 pH 可能微变,冷却后复核,必要时再调。
五、主要用途
细胞培养:洗涤细胞、稀释细胞悬液,维持缓冲环境。
免疫实验:免疫组化、免疫荧光的洗涤和抗体稀释。
ELISA:包被后洗涤、样品和抗体稀释。
蛋白实验:透析、纯化过程中的缓冲介质。
组织处理:组织切片的洗涤和缓冲。
六、常见问题
问:PBS 缓冲液是什么?
答:磷酸盐缓冲盐水,由氯化钠、氯化钾、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾组成,pH 约 7。2 到 7。4、等渗,对细胞温和,实验室通用。
问:PBS 怎么配?
答:氯化钠约 8 克、氯化钾约 0。2 克、磷酸氢二钠(十二水)约 3。58 克、磷酸二氢钾约 0。24 克,纯水定容至 1000 毫升,调 pH 并灭菌。
问:PBS 和 TBS 有什么区别?
答:缓冲体系不同,PBS 用磷酸盐缓冲,TBS 用 Tris 缓冲,都含氯化钠保持渗透压,按实验体系选用。
问:PBS 能高压灭菌吗?
答:可以。高压灭菌后 pH 可能微变,冷却后复核,必要时微调。
问:PBS 怎么保存?
答:无菌分装、冷藏保存,标注日期,发现浑浊或污染即弃。
问:PBS 里的氯化钠能不加吗?
答:不能随意省。氯化钠维持渗透压,去掉后渗透压改变,细胞实验会受影响。
七、总结
PBS 缓冲液是什么?一句话:磷酸盐缓冲加盐水,pH 中性、等渗、对细胞温和。配方记住四盐,配制记住四步:称量、溶解、调 pH、定容灭菌。用对 PBS,细胞和免疫实验都顺。