蛋白质免疫印迹（Western Blot）即沉上样缓冲液 | 告别有毒臭味，解决飘样烦恼
2026-05-13 · 产品方案 · 百灵威授权转载
蛋白上样缓冲液——Loading Buffer的核心任务① 让蛋白变性、线性化：SDS去掉蛋白原有的电荷差异，还原剂（通常是DTT或β-巯基乙醇）切断二硫键，把所有蛋白“改造”成带负电的长链，在胶里的迁移速度只跟分子量有关。SDS与硫醇试剂一起使蛋白质线性化，在电泳时蛋白质的分离只与分子大小有关而与形状等无关。②让样品乖乖待在孔里：密度剂（传统用甘油）让样品沉到点样孔底部，防止样品被冲走。
做WB的人大概都经历过这些名场面：
· 样品准备时，空气里弥漫着一股“生化实验室专属气味”，隔壁组同事路过都要屏住呼吸；
· 加完样转头一看，样品飘出孔位，像是长了腿一样到处乱窜；
· 跑完胶一显影，条带歪七扭八，同一泳道里的蛋白好像各自有自己的想法。
这些Bug，其实都指向一个问题——Loading Buffer选得不对！！
传统Loading Buffer的两个槽点，让WB体验大打折扣
① 难闻的有毒气味
DTT或β-巯基乙醇，还原效果不错，但气味刺鼻，有毒性，使用过程需要在通风橱里进行。更重要的是，这种挥发性物质在加热过程中会进一步释放，长期接触对实验者的安全和健康都是隐患。
② 样品飘出加样孔
甘油作为传统密度剂，有时沉降效果不理想。样品进入点样孔后不能迅速沉底，在电泳液冲击下易扩散或漂出孔位。导致孔间交叉污染，条带歪斜，甚至同一泳道的蛋白跑出几种不同速度——数据没法用，实验重做。
百灵威即沉SDS-PAGE上样缓冲液：换个成分，体验完全不同
| Loading Buffer | 溴酚蓝 | SDS | 还原剂 | 沉降剂 |
|---|---|---|---|---|
| 传统型 | ✓ | ✓ | DTT/β-巯基乙醇 | 甘油 |
| 百灵威即沉SDS-PAGE 上样缓冲液 | ✓ | ✓ | 新型还原剂 | 新型沉降剂 |
百灵威即沉SDS-PAGE 上样缓冲液优点总结：
①新型还原剂：高效切断二硫键实现蛋白质完全变性，同时避免了DTT和β-巯基乙醇的毒性、臭味以及对人体健康的潜在风险。且具备更佳的稳定性和更广的兼容性。
②新型沉降剂：加入样品后即快速沉降至孔底，有效防止样品在电泳过程中扩散或飘出，大大降低了孔间交叉污染的风险，电泳条带更清晰、批内重复性更高。
图1. 百灵威即沉SDS-PAGE上样缓冲液上样效果
蛋白样品制备核心
蛋白上样缓冲液
| 品名 | CAS | 货号 |
|---|---|---|
| 2X即沉SDS-PAGE 上样缓冲液(还原型) 2X即沉SDS-PAGE 上样缓冲液(还原型) | / | AIWB-002 |
| 5X即沉SDS-PAGE 上样缓冲液(还原型) 5X即沉SDS-PAGE 上样缓冲液(还原型) | / | AIWB-0025 |
| 5X即沉SDS-PAGE 上样缓冲液(还原型) 5X即沉SDS-PAGE 上样缓冲液(还原型) | / | AIWB-0025M |
| 5X即沉SDS-PAGE 上样缓冲液(非还原型) 5X即沉SDS-PAGE 上样缓冲液(非还原型) | / | AIWB-0025N |
还原剂
| 品名 | CAS | 货号 |
|---|---|---|
| 2-Mercaptoethanol, 99%, for electrophoresis and molecular biology 2-巯基乙醇 | 60-24-2 | 249096促 危化品 |
| Tris(2-carboxyethyl)phosphine hydrochloride, 98% 三(2-羧乙基)膦盐酸盐 | 51805-45-9 | 312334 |
| DL-Dithiothreitol, 98% DL-二硫苏糖醇 | 3483-12-3 | 973723 |
变性剂（SDS）
| 品名 | CAS | 货号 |
|---|---|---|
| Sodium dodecyl sulfate, 99%, for electrophoresis 十二烷基硫酸钠 | 151-21-3 | 160975促 |
| Lithium dodecyl sulfate, 99%, for bio 十二烷基硫酸锂 | 2044-56-6 | 938660 |
样品裂解与提取
| 品名 | CAS | 货号 |
|---|---|---|
| Co-IP/WB组织/细胞通用裂解液(含蛋白酶抑制剂) Co-IP/WB组织/细胞通用裂解液(含蛋白酶抑制剂) | / | AIWB-012 |
| RIPA cracking solution RIPA裂解液 | / | 973838 |
| High-Strength RIPA Lysate Buffer , Without Inhibitors 高强度 RIPA 裂解液 | / | 9456317 |
| 蛋白酶抑制剂(50X) 蛋白酶抑制剂(50X) | / | AFP-50X |
| Protease inhibitor mixture, 100 × PIC 蛋白酶抑制剂混合液 | / | 9456142 |
| Protease Inhibitor Mixture , EDTA-Free, 100×in DMSO 蛋白酶抑制剂混合液 | / | 9456319 |
| Phosphatase inhibitor, 50× 磷酸酶抑制剂 | / | 9456144 |
| α-Toluenesulfonyl fluoride, 99% α-甲苯基磺酰氟 | 329-98-6 | 562981 |
蛋白浓度测定
| 品名 | CAS | 货号 |
|---|---|---|
| 即用型BCA蛋白浓度测定试剂盒 即用型BCA蛋白浓度测定试剂盒 | / | PC0024-50T |
| 即用型BCA蛋白浓度测定试剂盒 即用型BCA蛋白浓度测定试剂盒 | / | PC0024-10*50T |
| BCA蛋白浓度测定试剂盒 BCA蛋白浓度测定试剂盒 | / | PC0020-50T |
| Bradford蛋白定量试剂盒 Bradford蛋白定量试剂盒 | / | R21252 |
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