高效细胞破碎与RNA提取——玻璃珠法的原理与应用
2025-08-19 · 推荐产品 · 百灵威授权转载
玻璃珠法是一种高效的RNA提取技术,特别适用于微生物或细胞壁较厚的样本。其核心原理是利用玻璃珠或氧化锆珠的剧烈震荡,通过机械剪切力破坏细胞壁和细胞膜,从而释放胞内RNA。该方法可单独使用,也可结合酚氯仿法或柱纯化技术进一步提高RNA的纯度。相较于传统的化学裂解法,玻璃珠法能更彻底地破碎顽固细胞,尤其适用于真菌、革兰氏阳性菌等难裂解样本。此外,该方法操作灵活,可搭配溶菌酶或溶壁酶协同作用,以优化裂解效率。
为确保RNA的完整性和稳定性,实验过程中需注意避免核酸酶的降解。在细胞裂解后,可加入蛋白酶K消化残留蛋白质,并使用DNase I去除基因组DNA污染。若样本量较少,可引入糖原作为载体以提高RNA回收率。对于后续的RNA纯化,既可选用有机溶剂萃取法,也可采用硅胶柱吸附技术,具体取决于实验需求。玻璃珠法因其高效、适用范围广等特点,已成为微生物RNA提取的重要方法之一,广泛应用于转录组学、病原体检测等领域。核心产品
| 品名 | CAS | 货号 |
|---|---|---|
| Glass-Fiber Wool 玻璃纤维 | 65997-17-3 | 1268672 |
| Zirconium(IV) oxide, 99% 氧化锆(IV) | 1314-23-4 | 616897 |
| 总蛋白提取细胞裂解缓冲液 总蛋白提取细胞裂解缓冲液 | / | R0278 |
| 溶壁酶 来源于藤黄节杆菌 溶壁酶 来源于藤黄节杆菌 | 37340-57-1 | L2524 |
| Lysozyme, from chicken egg, ≥20,000 units/mg 溶菌酶 | 12650-88-3 | 302969 |
| Proteinase K, for bio, 30-40U/mg 蛋白酶 K | 39450-01-6 | 968706 |
| RNA Sample preservation solution RNA样品保存液 | / | R916331 |
| Deoxyribonuclease I, from bovine pancreas, ≥2000 Kunitz U/mg 脱氧核糖核酸酶 I | 9003-98-9 | 231871 |
| TRIzol LS Reagent TRIzol LS Reagent | / | T718636 |
| Glycogen, from oyster 糖原 | 9005-79-2 | 312586 |
耗材
| 品名 | CAS | 货号 |
|---|---|---|
| Crimp-top vials, 2ml, 11.6×32mm, amber, large opening 样品瓶 | / | 917578 |
| Snap ring vial caps and septa, 11 mm blue PE cap, centre hole 6 mm, red PTFE/white silicone/red PTFE septum 卡口样品瓶组合盖垫 | / | 915833 |
| Robotic tips (Compatible with Tecan robotic) , 1000μl, sterile, low retention, 96 tips/rack 自动化吸头(适配Tecan设备) | / | 918409 |
| Centrifuge tubes, 0.6 mL, clear, 1000 tubes/pack 离心管 | / | 910854 |
智慧实验室
| 品名 | CAS | 货号 |
|---|---|---|
| RFID Fireproof Cabinet HCE-400, Container size: 900*500*1980 mm, internal size: 650*420*1550 mm, volume 423 L RFID 防火柜 HCE-400 | / | 9410142 |
Bio-Vanguard
| 品名 | CAS | 货号 |
|---|---|---|
| Antibacterial polycotton laboratory coats, S(≤165cm,≤50kg) 涤棉抗菌实验服 | / | 909089 |
| Antibacterial 100% Cotton laboratory coats, men, XXL (≥180 cm, ≥80 kg), long-sleeved 抗菌纯棉实验服 | / | 9307385 |
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