核酸纯化全攻略：质粒DNA与RNA提取
2025-08-04 · 推荐产品 · 百灵威授权转载
核酸纯化是分子生物学研究的核心技术之一，其质量直接影响下游实验（如PCR、测序、克隆等）的结果可靠性。本指南系统介绍两种最常用的核酸提取方法：碱裂解法提取质粒DNA和有机溶剂法分离RNA，并提供经过验证的实验方案与配套试剂信息，帮助研究者获得高纯度核酸样本。
DNA纯化：从生物样本中分离质粒或基因组DNA，去除蛋白质、RNA及细胞碎片
RNA纯化：提取完整RNA分子，需抑制RNase活性
| 参数 | DNA | RNA |
|---|---|---|
| 稳定性 | pH 7-10稳定 | pH 5-7稳定 |
| 降解风险 | 机械剪切力 | RNase水解 |
| 储存条件 | -20℃（长期-80℃） | -80℃（避免反复冻融） |
碱裂解法质粒DNA提取
细胞处理试剂
| 品名 | CAS | 货号 |
|---|---|---|
| Tris(hydroxymethyl)aminomethane, 99.5%, extra pure 三(羟甲基)氨基甲烷 | 77-86-1 | 226162 |
| Ethylenediaminetetraacetic acid, 99%, reagent grade 乙二胺四乙酸 | 60-00-4 | 932641 |
| D-(+)-Glucose, 99%, for bio D-(+)-葡萄糖 | 50-99-7 | 936778促 |
裂解中和试剂
| 品名 | CAS | 货号 |
|---|---|---|
| Sodium hydroxide, 96%, for analysis 氢氧化钠 | 1310-73-2 | 904646 危化品 |
| Sodium dodecyl sulfate, 99%, for biochemistry 十二烷基硫酸钠 | 151-21-3 | 105893促 |
| Potassium acetate, 99%, for analysis 乙酸钾 | 127-08-2 | 978296 |
| Acetic acid, 99.5%, for analysis 乙酸 | 64-19-7 | 991956 危化品 |
纯化保存试剂
| 品名 | CAS | 货号 |
|---|---|---|
| Ethanol, 99.7%, reagent grade, anhydrous 乙醇 | 64-17-5 | 983081 危化品 |
| Ribonuclease A, from bovine pancreas, ≥50 Kunitz units/mg 核糖核酸酶 A | 9001-99-4 | 139924 |
RNA分离提取
TRIzol/酚氯仿法（经典有机溶剂法）
| 品名 | CAS | 货号 |
|---|---|---|
| Trizol total RNA extraction reagent 三唑 总RNA提取试剂 | / | 9456131 |
| Isopropanol, 99.7%, for synthesis 异丙醇 | 67-63-0 | 923740 危化品 |
| Ethanol, 99.7%, reagent grade, anhydrous 乙醇 | 64-17-5 | 983081 危化品 |
| Glycogen, from oyster 糖原 | 9005-79-2 | 312586 |
| 2-Mercaptoethanol, 99%, for electrophoresis and molecular biology 2-巯基乙醇 | 60-24-2 | 249096促 危化品 |
| Diethyl pyrocarbonate, 97% 焦碳酸二乙酯 | 1609-47-8 | 360062 |
| Sodium acetate, 99%, anhydrous, for analysis 醋酸钠 | 127-09-3 | 988100 |
磁珠法（高通量/自动化首选）
| 品名 | CAS | 货号 |
|---|---|---|
| Beads MagCOOH, 10mg/mL, 2.8μm 羧基磁珠 | / | 9298184 |
| Beads MagNH2, 10mg/mL, 500nm 氨基磁珠 | / | 9298175 |
| Silica magnetic beads, 1.2µm, 50mg/mL 硅基磁珠 | 14808-60-7 | 913146 |
| Beads Streptavidin, 10 mg/mL, 2 μm 链霉亲和素磁珠 | / | 9298201 |
| Guanidine thiocyanate, 97%, for bio 硫氰酸胍 | 593-84-0 | 915564 |
| Proteinase K, for bio, 30-40U/mg 蛋白酶 K | 39450-01-6 | 968706 |
| Deoxyribonuclease I, from bovine pancreas, ≥2000 Kunitz U/mg 脱氧核糖核酸酶 I | 9003-98-9 | 231871 |
| Water, HPLC grade 水 | 7732-18-5 | 187553 |
| Poly(ethylene glycol), reagent grade, average Mn 1500 聚乙二醇 | 25322-68-3 | 980553 |
相关耗材
| 品名 | CAS | 货号 |
|---|---|---|
| Pipette tips, 200 μL, yellow, 1000 tips/pack 移液器吸头 | / | 970956 |
| Centrifuge tubes, 1.5 mL, clear, 500 tubes/pack 离心管 | / | 915664 |
通用试剂
| 品名 | CAS | 货号 |
|---|---|---|
| Kanamycin sulfate, an aminoglycoside bacteriocidal antibiotic which acts by binding to the bacterial 30S ribosomes 硫酸卡那霉素 | 25389-94-0 | 357211 |
| Agarose, low EEO 合成琼脂糖 | 9012-36-6 | 950081 |
| Ethidium bromide, 95%, for bio 溴化乙啶 | 1239-45-8 | 904988 |
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