食用植物油中辣椒素的两种固相萃取检测方法
2023-11-28 · 推荐产品 · 百灵威授权转载
辣椒素类物质被广泛应用于食品工业中。正常情况下，食用植物油中不含或仅含有微量辣椒素，而地沟油的制作由于不能很好地去除辣椒素，因此在地沟油中均能检测出高含量辣椒素。辣椒素成为检验食用油是否为地沟油的典型标志物。
本文介绍两种固相萃取法，分别以C18小柱和Silica小柱作为前处理方式测定食用植物油中辣椒素含量。两种方法均可用于“地沟油”中辣椒素含量的检测。方法一
一、样品提取
准确称取0.5g试样于50mL离心管中，加入500µL二氯甲烷，再加入3mL 2%NaOH溶液，涡旋10min，混匀，4000r/min离心10min，移出水层，残余物再用3mL 2%NaOH溶液重复提取一次，合并水相，用稀硫酸（水：浓硫酸=1:15，v/v）调节pH至2～3之间，备用。二、样品净化（973436C18固相萃取小柱，填料500mg,柱体积6ml）
活化：C18柱使用前用5mL乙腈、5mL水活化。上样和洗脱：取备用液全部过柱，弃去流出液；加5mL水淋洗，弃去流出液；抽干小柱，加5mL乙腈洗脱，收集洗脱液（上样、洗脱过程流速控制在1mL/min内）。
上机测试：洗脱液于50℃氮吹至近干，用1mL 80%甲醇水溶液溶解，经0.45µm有机滤膜过滤，供上机测试。
三、仪器条件
色谱柱：InertSustain-C18 (4.6mm×250mm，5µm)检测器：Waters2475荧光检测器
检测波长：激发波长：229nm；发射波长：320nm
流动相：A：水 B：甲醇
洗脱方式：等度洗脱，A：B=20：80
流速：1.0mL/min
进样体积：20µL
四、检测结果
表1 0.5mg/kg食用植物油中辣椒素的添加回收结果
图1 添加水平为2.4mg/kg植物油中天然辣椒素检测的液相色谱图
图2 添加水平为2.4mg/kg植物油中合成辣椒素检测的液相色谱图
方法二
一、样品提取
准确称取2.0g试样于50mL离心管中，加入10mL正己烷，振荡提取10min，备用。二、样品净化（937117 Silica固相萃取小柱，填料500mg,柱体积6ml
活化：Silica柱使用前用5mL甲醇洗去杂质，再5mL丙酮活化，5mL正己烷平衡。上样和洗脱：取备用液全部过柱，弃去流出液；加5mL正己烷到提取管中，混匀，全部转移到柱中，弃去流出液；加5mL20%乙酸乙酯/正己烷溶液（1:4，v/v）淋洗，弃去流出液，抽干小柱；用4mL甲醇洗脱，收集洗脱液（上样、洗脱过程流速控制在1mL/min内）。
上机测试：洗脱液用甲醇定容至4mL，经0.22µm滤膜过滤，供上机测试。
三、仪器条件
色谱柱：InertSustain-C18 (4.6mm×250mm，5µm)检测器：Waters2475荧光检测器
检测波长：激发波长：229nm；发射波长：320nm
流动相：A：水 B：甲醇
洗脱方式：等度洗脱，A：B=20：80
流速：1.0mL/min
进样体积：20µL
四、检测结果
表2 2.4mg/kg食用植物油中辣椒素的添加回收结果
图3 添加水平为2.4mg/kg植物油中天然辣椒素检测的液相色谱图
图4 添加水平为2.4mg/kg植物油中合成辣椒素检测的液相色谱图
产品列表
| 品名 | 分类 | 货号 |
|---|---|---|
| Capsaicin, 99%, from Capsicum annuum L. 天然辣椒素 | 标准品 | 196918 |
| Capsaicin, 98% 合成辣椒素 | 标准品 | 104687 |
| Dichloromethane, 99.8% 二氯甲烷 | 试剂 | 947068 |
| Sodium hydroxide, 96%, for analysis 氢氧化钠 | 试剂 | 904646 |
| Acetonitrile, 99.9%, LC-MS 乙腈 | 试剂 | 932537 |
| Methanol, 99.9%, LC-MS 甲醇 | 试剂 | 952707 |
| n-Hexane, 95% 正己烷 | 试剂 | 939298 |
| Ethyl acetate, 99%, for analysis 乙酸乙酯 | 试剂 | 966734 |
| C18(hydrophilic) SPE Cartridges, bed wt. 500 mg, volume 6 ml 亲水C18固相萃取小柱 , 填料500 mg, 柱体积6 ml | 耗材 | 973436 |
| Silica SPE Cartridges, bed wt. 500 mg, volume 6 ml Silica 固相萃取小柱 , 填料500 mg, 柱体积6 ml | 耗材 | 937117 |
| Nylon 66 syringe filter 有机系尼龙66 针式过滤器 , 未灭菌, 13 mm, 0.22 µm | 耗材 | 9215892 |
| Nylon 66 syringe filter 有机系尼龙66 针式过滤器 , 未灭菌, 13 mm, 0.45 µm | 耗材 | 9215893 |
| Centrifuge tubes, 50 mL 离心管, 50 mL | 耗材 | 966183 |
| Single-channel mechanical pipettor 单道手动可调移液器 , 量程: 100 - 1000 μL, 最小刻度: 5.0 μL | 耗材 | 1122427 |
| Pipette tips, 1000 μL 移液器吸头 , 1000 μL, 无色, 96 个/盒 | 耗材 | 1438559 |
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