猪肉中19种磺胺类兽药残留的UPLC-MS-MS测定（QuEChERS方法）
2023-09-18 · 推荐产品 · 百灵威授权转载
磺胺类药物廉价且高效，常用于生猪的疾病防治，有时甚至直接作为饲料添加剂用来促生长或增产，但是过量使用会导致其在猪肉中残留。研究显示，磺胺类药物代谢时间长且有蓄积性，食用磺胺类药物残留的生鲜猪肉对人类存在健康隐患。猪肉中脂质含量20%~30%，磷脂含量1%~3%， 在对这类高脂质样品进行检测和分析时，共萃取的磷脂会在色谱柱上聚集，影响色谱柱使用寿命；同时磷脂会使质谱信号产生离子抑制，导致质谱分析中的低回收率，进而影响仪器分析的灵敏度和方法的重现性。
为有效实现样品中的磷脂去除和脂质吸附，百灵威开发磷脂去除磺胺专用QuEChERS净化管，并建立了采用QuEChERS方法检测猪肉中19种磺胺类兽药残留的LC-MS/MS方法。该方法两个水平（5ng/g 和10ng/g）的加标回收率均在60-120 %之间，RSD小于10 %，操作简便快捷，与进口品牌相比，具有较高的回收率和良好的磷脂去除和脂质净化效果，能够作为猪肉中磺胺类兽药残留检测的参考方法。样品前处理
一、样品提取
将猪肉样品粉碎均匀，称取2.0g猪肉于50mL离心管中， 加入4mL水，涡旋混匀2min；再加10mL 1%乙酸乙腈，涡旋混匀10min；之后再加入QuEChERS盐包，涡旋2min，在4℃下5000r/min离心5min。静置15min，上层乙腈层待净化。二、样品净化
取待净化的上层乙腈层6mL于15 mL 磺胺专用 QuEChERS净化管中， 涡旋 2min，5000r/min离心5min。取上清液4mL乙腈层转移至另一试管中，40℃下氮气吹干，用含0.1%甲酸的甲醇-水溶液（水：甲醇=9:1溶液）定容至1 mL，过0.22μm滤膜，待上机测试。三、标准曲线配置
选同类型空白样品，按上述前处理方法进行操作，收集过柱流出液，加入适量的标液后与样品一同氮吹复溶，配制成上机浓度分别为2μg/L、10μg/L、50μg/L、100μg/L、 200μg/L、500μg/L的标准曲线。分析检测
一、液相色谱条件
色谱柱：Agilent AdvanceBio (2.1mm×100mm，2.7µm)流动相：A：0.1%甲酸水 B：0.1%甲酸的甲醇-乙腈溶液（甲醇:乙腈=2:8）
流速：0.3mL/min
柱温：35℃
进样量：10µL
洗脱方式：梯度洗脱，见表1
表1：梯度洗脱程序表
二、质谱条件
离子源：HESI电喷雾电压：3500V
鞘气压力：40arb
辅气压力：2arb
离子传输管：380℃
辅气温度：350℃
组分、保留时间及特征离子对照表见表2
表2：组分、保留时间、特征离子对照表（*为定量离子）
三、检测结果
图1
图1-5不同品牌净化处理猪肉样品后的TIC图，子离子扫描m/z=184 （①猪肉样品-未净化处理 ②进口A品牌-净化处理 ③进口B品牌-净化处理 ④进口C品牌-净化处理 ⑤J&K Scientific-净化处理 ） 图6 添加水平为5 ng/g时猪肉样品中19种磺胺类兽残TIC色谱图
表3：19种磺胺类兽药加标回收实验结果
标准品
| 品名 | CAS | 货号 |
|---|---|---|
| Sulfacetamide 磺胺醋酰 | 144-80-9 | DRE-C16988850 |
| Sulfapyridine 磺胺吡啶 | 144-83-2 | DRE-C17000100 |
| Sulfadiazine 磺胺嘧啶 | 68-35-9 | DRE-C16990500 |
| Sulfamethoxazole 磺胺甲恶唑 | 723-46-6 | DRE-C16998100 |
| Sulfathiazole 磺胺噻唑 | 72-14-0 | DRE-C17000200 |
| Sulfamerazine 磺胺甲基嘧啶 | 127-79-7 | DRE-C16995100 |
| Sulfisoxazole 磺胺甲基异恶唑 | 127-69-5 | DRE-C17000450 |
| Sulfamethizol 磺胺甲噻二唑 | 144-82-1 | DRE-C16998000 |
| Sulfabenzamide 苯甲酰磺胺 | 127-71-9 | DRE-C16988800 |
| Sulfisomidine 磺胺索嘧啶 | 515-64-0 | DRE-C17000400 |
| Sulfamethazine, 99%, reference material 磺胺二甲基嘧啶 | 57-68-1 | 959430 |
| Sulfamethoxypyridazine 磺胺甲氧吡嗪 | 80-35-3 | DRE-C16998150 |
| Sulfameter 磺胺对甲氧嘧啶 | 651-06-9 | DRE-C16995150 |
| Sulfamonomethoxine, 97%, reference material 磺胺间甲氧嘧啶 | 1220-83-3 | 908544 |
| Sulfachloropyridazine 磺胺氯哒嗪 | 80-32-0 | DRE-C16990100 |
| Sulfadoxine 磺胺邻二甲氧嘧啶 | 2447-57-6 | DRE-C16990600 |
| Sulfaphenazole 磺胺苯吡唑 | 526-08-9 | DRE-C17000080 |
| N4-Phthalylsulfathiazole 酞磺胺噻唑 | 85-73-4 | DRE-C16190550 |
耗材
| 品名 | 货号 |
|---|---|
| QuEChERS兽残专用 , 兽残专用盐包50ml和净化管15ml, 50套/盒 | 2794402 |
| 有机系尼龙66 针式过滤器 | 9215892 |
| 样品瓶瓶盖 , 9 mm, 红色PTFE/白色硅胶隔垫, 蓝色螺口开口瓶盖 | 940292 |
| 短螺纹样品瓶 , 2ml, 9mm, 11.6×32mm, 棕色, 广口, 带书写签 | 902590 |
试剂
| 品名 | CAS | 货号 |
|---|---|---|
| Acetonitrile, 99.9%, LC-MS 乙腈 | 75-05-8 | 932537 |
| Formic acid, 98%, for LC-MS 甲酸 | 64-18-6 | 942988 |
| Methanol, 99.9%, LC-MS 甲醇 | 67-56-1 | 952707 |
| Acetic acid, 99.5%, for analysis 乙酸 | 64-19-7 | 991956 |
更多信息，请关注百灵威分析公众号：
百灵威分析公众号
相关阅读
百灵威基础耗材——分析领域通用动物源性食品中14种喹诺酮类药物残留测定-液相色谱-质谱/质谱法
GB 31658.17-2021 动物性食品中多兽残分析解决方案
