李新教授科研成果 | 荧光探针Na-8，高时空分辨率活细胞成像
2020-10-12 · 推荐产品 · 百灵威授权转载
化疗是目前治疗癌症的主要手段，但肿瘤细胞可能产生耐药性，其机制较复杂，其中高水平的还原型谷胱甘肽（GSH）可能是造成这一现象的重要原因。为揭示GSH在化学耐药性中详细作用，寻找一种可靠的活细胞检测方法至关重要。
李新副教授科研团队利用缺电性C(2p)-S(3p)对GSH亲核攻击的敏感性，并基于点击化学合成方法构建了小规模探针库，且从中筛选出一种功能性最强的新型荧光探针Na-8，可用于检测活细胞中内源性GSH含量。
![图1 检测原理：Na-8穿透细胞膜，被细胞内的GSH亲核进攻形成连接物，从而留在细胞内<sup>[1]</sup>。](/assets/jk-articles-all/66078f2e2237b45b276ad8ec.png)
图1 检测原理：Na-8穿透细胞膜，被细胞内的GSH亲核进攻形成连接物，从而留在细胞内[1]。
该探针具有如下优势：
- 灵敏度高：与GSH产生的荧光反应最大达2200倍；检测限低至25nM，可满足体内GSH的检测识别；
- 特异性强：检测几乎不受其它生物硫醇（如Cys和Hcy）存在的干扰；
- 酸性环境也适用：pH6.5-10范围内，对检测干扰较小；
- 可定量检测：在0-3.0 mM的GSH浓度范围内，荧光强度与浓度呈良好线性关系（图2）。
![图2 GSH浓度高于3.0 mM时，荧光反应达到最大值(Fmax)，Fmax减去荧光强度(F)的自然对数与GSH浓度（0-3.0 mM范围内）呈良好线性关系<sup>[1]</sup>。](/assets/jk-articles-all/01cf98e82197f01174b0b83b.jpg)
图2 GSH浓度高于3.0 mM时，荧光反应达到最大值(Fmax)，Fmax减去荧光强度(F)的自然对数与GSH浓度（0-3.0 mM范围内）呈良好线性关系[1]。
同时，李新教授科研团队利用Na-8，已实现肝癌细胞HepG2和正常细胞L02内GSH的检测识别，并证实肝癌细胞中高GSH含量是造成肝癌细胞耐药的机制之一[1]。
李新教授曾任职于E.J. Corey教授实验室（博士后），现于浙江大学从事药物化学研究工作。她的实验室针对多数生物分子难以实现体内原位检测的问题，在类药性原则指导下基于生物分子的化学反应性设计荧光探针，为深入研究相关病理过程的分子机制提供灵敏可靠的检测工具和技术。
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