刘祥军副研究员科研成果 | 荧光探针HQO—准确示踪线粒体自噬
2020-08-12 · 推荐产品 · 百灵威授权转载
线粒体自噬(mitophagy)是细胞清除损伤或衰老的线粒体，并循环利用其组成元素的过程。其与衰老、神经退行性疾病和癌症等诸多生理病理过程密切相关，因此线粒体自噬的研究具有重要意义。
目前，对线粒体自噬的研究主要采用2种方法：
- 抗体或荧光蛋白标记法
- 线粒体荧光探针和溶酶体荧光探针组合使用共同检测的方法
但两种方法都存在弊端，前者操作复杂，在活细胞中应用受到限制；而后者特异性较低。
中国科学院化学研究所刘祥军和邴涛副研究员研发的探针分子HQO 可精确定位线粒体，准确示踪线粒体自噬过程（图1）；为线粒体代谢过程提供新的研究方法，也为筛选线粒体自噬抑制剂或促进剂提供有效的工具。
它无需与其它探针分子组合使用，进入活细胞后选择性富集于线粒体；当线粒体发生自噬形成自噬溶酶体后其微环境pH下降，使HQO质子化；质子化后HQO的荧光激发和发射波长均发生红移（斯托克斯位移大于100 nm）。
由于微环境pH值的不同，使得HQO在线粒体和自噬溶酶体中呈现不同颜色荧光（图2），因而可以很好地区分正常线粒体和包被损伤线粒体的自噬溶酶体[1]（见图1）。
![图1 HQO示踪活细胞线粒体自噬过程原理图<sup>[1]</sup>。](/assets/jk-articles-all/696feaab42acb1d2fa4793c9.jpg)
图1 HQO示踪活细胞线粒体自噬过程原理图[1]。
![图2 HQO具有两个激发与相应发射波长，一个示踪线粒体，一个示踪自噬溶酶体，通过两个波长的变化来阐述自噬流进程<sup>[1]</sup>。](/assets/jk-articles-all/95f2d59638857aa5464eb600.jpg)
图2 HQO具有两个激发与相应发射波长，一个示踪线粒体，一个示踪自噬溶酶体，通过两个波长的变化来阐述自噬流进程[1]。
百灵威向全球科学家提供刘祥军副研究员科研成果转化的荧光探针HQO：
产品使用说明
- 细胞的培养：将细胞种植于共聚焦培养皿中，根据不同实验需要种植相应细胞密度及培养相应时间。
- 诱导自噬、细胞染色和共聚焦成像：适当条件诱导自噬（如无血清培养基、PBS或者细胞自噬激活剂处理等），HQO（10 μM）加入无血清培养基中，37℃孵育10 min，PBS洗涤1-3次，共聚焦成像。559 nm激发，570-610 nm发射波长为示踪正常线粒体的荧光；635 nm激发，650-730 nm发射波长为示踪自噬溶酶体的荧光。
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