DTNB(Ellman 试剂)(5,5-二硫代-双-(2-硝基苯甲酸))
2020-08-19 · 推荐产品 · 百灵威授权转载
DTNB即5,5'-二硫双(2-硝基苯甲酸)，俗称Ellmann 试剂。在巯基化合物的存在下，无色的DTNB转变成黄色的5-巯基-2-硝基苯甲酸，由于5-巯基-2-硝基苯甲酸在412 nm处具有最大吸收，DTNB的吸收光谱并不干扰巯基的测定，所以DTNB常用于比色法测定蛋白质、多肽组织中的巯基；也可用于有机磷农药中毒的监测(胆碱酯酶测定)。
- 通过严格的质量检测，符合或高于行业标准；
- 大量供应。
技术说明书
DTNB 即Ellmann 试剂通用的配置方法为：
准确称取0.198 g DTNB 用50 mM Na2HPO4（pH7.0）配制成50mL 溶液，存放于棕色瓶中，于暗处低温保存备用。注意事项：配置、储存时要避光。
以半胱氨酸中自由巯基的定量检测方法为例，具体操作为：
-
试剂的配制：
- Tris-HCL 缓冲液（0.25 M）：DDW 准确配制后，用盐酸调节pH 8.3;
- 半胱氨酸标准溶液（1 mM）：准确称取0.017563g L- 半胱氨酸（175.63），用1 mL 甲酸溶解，以DDW 定容至100 mL；
- DTNB（分子量：396.35）标准溶液（10 mM）：准确称取0.198175 g DTNB 用50mM Na2HPO4（pH＝7.0）配制成50 mL 溶液，存放于棕色瓶中，于暗处低温保存备用；
- DTNB 分析溶液（0.1 mM）：由1 体积10 mM DTNB 标准液加99 体积0.25 M 的Tris 缓冲液配制而成，现用现配。
-
标准曲线的制作：
- 25℃条件下，用Tris 缓冲液稀释L- 半胱氨酸标准液，配成梯度的稀释液（5.0 mL），其浓度分别为：0.00 mM、0.025 mM、0.05 mM、0.1 mM、0.15 mM、0.2 mM；
- 取上述各浓度溶液1mL 分别加入到5mL 预先恒温于25℃水中的DTNB 分析溶液，摇匀，准确静止10 min，立即于波长412 nm 处测定吸光度值（A），根据目的蛋白的吸光度在标准曲线上读出对应的浓度即可。
试剂
| 品名 | CAS | 货号 |
|---|---|---|
| L-Cysteine, 97%, for bio L-半胱氨酸 | 52-90-4 | 989801 |
| Sodium phosphate dibasic, 99%, for bio 磷酸氢二钠 | 7558-79-4 | 284367 |
| Tris(hydroxymethyl)aminomethane 三羟甲基氨基甲烷 | 77-86-1 | SY010367 |
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|---|---|---|
| Acetylthiocholine iodide, 98% 碘化乙酰硫代胆碱 , 98% | 1866-15-5 | 286089 |
| 5-Bromo-4-chloro-3-indolyl-N-acetyl β-D-glucosaminide, 98% 5-溴-4-氯-3-吲哚基-N-乙酰基-β-D-氨基葡萄糖苷 , 98% | 4264-82-8 | 265978 |
| S-Butyrylthiocholine iodide, 99% S-丁酰基硫代胆碱碘化物, 99% | 1866-16-6 | 157752 |
| 2-Chloro-4-nitrophenyl α-L-fucopyranoside, 98% 2-氯-4-硝基苯基 α-L-岩藻糖苷 , 98% | 157843-41-9 | 280513 |
| α-Ketoglutaric acid, 99%, reagent grade α-酮戊二酸 , 99% , 试剂级 | 328-50-7 | 453795 |
| L-Lactic acid lithium salt, 99% L-乳酸锂盐 , 99% | 27848-80-2 | 158656 |
| 6-Methyl-2-pyridinyl 2-(acetylamino)-2-deoxy-1-thio-β-D-glucopyranoside, 98% 6-甲基-2-吡啶基 2-(乙酰氨基)-2-脱氧-1-硫代-β-D-吡喃葡萄糖苷 , 98% | 149263-94-5 | 1413695 |
| 4-Nitrophenyl phosphate disodium salt, 98% 4-硝基苯基磷酸二钠盐 , 98% | 4264-83-9 | 1084029 |
| Oxamic acid sodium salt, 98% 草氨酸钠盐 , 98% | 565-73-1 | 294960 |
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