辣根过氧化物酶底物 ——品种丰富,助力您的酶免技术
2020-03-19 · 推荐产品 · 百灵威授权转载
酶免技术常应用的酶有过氧化物酶和碱性磷酸酶,针对不同的酶,所作用的底物是不同的。过氧化物酶,通常来源于辣根,因此称为辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase, HRP)。HRP具有分子量小、标记方法简单、性质稳定等优点,是临床检验试剂中一种常用的酶,被广泛用于生化检测项目及免疫类(ELISA)试剂盒。
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HRP发色底物
辣根过氧化物酶发色底物为过氧化物和供氢体(DH2),其真正底物是H2O2,人们往往习惯把供氢体称为底物或统称供氢体底物。在ELISA中常用的供氢体有以下几种:
1、OPD是ELISA技术中应用较多的供氢体,酶作用后显黄色(最大吸收波长为492 nm),灵敏度高,测定方便。
2、TMB是近年来常用的一种供氢底物,经酶作用后显天蓝色,目测对比度鲜明,加酸终止酶反应后变黄色(最大吸收波长为450 nm),易比色定量测定。
3、DAB供氢底物,其反应产物为不能溶解的棕色吩嗪衍生物,可用不同光镜观察。此种多聚物还能被还原和螯合四氯化碳,形成具有电子密度的产物,便于用电镜观察。
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Azinobis(3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid-2NH4-salt, 98%30931-67-0
2,2'-二氮-双(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)铵盐
反应产物:绿色、可溶
1g
HRP的发光底物
鲁米诺(3-氨基邻苯二甲酰肼, Luminol)或其衍生物如异鲁米诺(4-氨基邻苯二甲酰肼,Isoluminol),是一类重要的发光试剂。用HRP标记抗体,进行免疫反应后,利用鲁米诺作为发光底物,在HRP和起动发光试剂(NaOH + H2O2)作用下,鲁米诺发光,发光强度依赖于酶免疫反应物中酶的浓度。反应过程如下图所示:
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Tris(hydroxymethyl)aminomethane hydrochloride, Tris-HCl, 99%1185-53-1
三(羟甲基)氨基甲烷盐酸盐
5g, 25g, 100g, 500g